作者:西安博尔 发布日期: 2021-03-16 浏览量:
核酸检测实验室内要靠高投入采购高品质的试剂和仪器来提高检测的灵敏度,但是当检测量非常大的时候,谁也不能保证百分之百不出问题。核酸检测实验室准确的核心应该是人和严格的试验流程和管理制度。我们能做的是随时保持警惕,尽早发现,及时处置,最大程度减少损失。核酸检测实验室发生污染如何紧急处理呢?下面博尔实验室小编根据实验室工作人员的一次亲身经历来为大家解答。
实验员发现在一次qPCR实验中虽然阴性对照成立,但是4份阴性样品出现了扩增曲线。可以确定实验中发生了污染,但是从何时开始污染的?污染源是什么?影响到的试验有多少?这个时候我们需要一一排查,实验室一旦发生污染,第一时间不是纠结于到底哪里污染了,到底谁的责任导致的污染。绝大多数时间我们无法确定污染源,更不能轻易排除一项污染源。而是第一时间果断采取清除污染的措施。做好如下工作:
1.停止所有实验活动,查看当天所有的试验结果,发现只有一个实验受到了污染。
2.清理试剂准备区、核样本制备区和扩增区所有开封的试剂耗材;
3.离心管架、试管架等可重复使用的物品浸泡到84消毒液中过夜,第二天用清水清洗后晾干使用;
4.对移液器内外表面、核酸提取仪内部先用酒精擦拭后,再用核酸去除剂擦拭,同时启用备用的移液器;
5.对各区的生物安全柜、洁净工作台和实验台面先用酒精擦拭后,再用核酸去除剂擦拭;
6.对实验室地面用84消毒液进行清洁;
7.开窗通风。
污染清除的实验验证
1.在试剂准备区的洁净工作台面、样本制备区的生物安全柜内部、核酸提取仪内部和扩增区台面分别放置开盖装有PBS的离心管,过夜;
2.用采样拭子蘸PBS后对实验台面、生物安全柜台面和洁净工作台面反复擦拭后,放入PBS中进行洗脱。
3.用采样拭子蘸PBS后对移液器的内外表面进行取样,取样后放入PBS中进行洗脱。
4.将配液的移液器和加模板的移液器换上无滤芯枪头,在PBS中反复吹吸10次,测试移液器内部是否存在污染。
5.测试结果
5.1测试结果发现样本制备区的生物安全柜内加模板的移液器内外表面擦拭拭子为核酸阳性,其他检测都是阴性。
5.2对样本制备区的生物安全柜内加模板的移液器进行清洁和擦拭后,第二天对该移液器内表面和外表面擦拭拭子进行检测,仍有扩增分别为39.89和39.63。
5.3对样本制备区的生物安全柜内加模板的移液器进行清洁和擦拭后,过二天后对该移液器内表面和外表面擦拭拭子进行检测,检测结果为阴性。
持续监测
本次实验室污染事件发现到针对性解决,一共用时五天。最终可以确定是样本制备区的生物安全柜内加模板的移液器发生了污染。但是由于可能造成污染的因素很多,移液器是否是唯一的污染因素我们很难确定。后续的几天仍然在检测中增加阴性对照,持续对环境等样品进行监测,确保污染被彻底清除。
很多检测实验室被持续的不定期核酸污染所困扰,很重要的原因是未能及时发现污染并在第一时间彻底的处理。每个实验室都应该结合自己实验室的情况建立规范的污染处置规程,确保在下一次污染发生时能尽早尽快解决。